显微镜物像是否清楚不仅决定于放大倍数,还与显微镜的分辨力(resolution)有关,分辨力是指显微镜(或人的眼睛距目标25cm处)能分辨物体最小间隔的能力,分辨力的大小决定于光的波长和数值孔径(又称:镜口率)以及介质的折射率,用公式表示为:
显微镜的分辨力: R=0.61λ /NA
NA=nSin α/2 (数值孔径)
式中: λ 为成像光线的波长;
n = 标本和物镜之间介质折射率;
α = 镜口角(标本对物镜镜口的张角) ;
NA = 数值孔径(numeric aperture)。
镜口角总是要小于180?,所以Sin α /2 的最大值必然小于1 。
介质的折射率n:
介质 |
空气 |
水 |
香柏油 |
α溴萘 |
折射率 |
1 |
1.33 |
1.515 |
1.66 |
制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78,所用介质的折射率越接近玻璃的越好。 对于干燥物镜来说,介质为空气,数值孔径一般为0.05~0.95;油镜头用香柏油为介质,数值孔径可接近1.5。