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本文标题:"电子显微镜研究细胞的精细结构的实验方法简介"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2014-4-19 17:15:0

    研究细胞的精细结构时,还可采用一种很有用的方法,叫做表面展开法。展开
层附着在铜网上,干燥后再经过金属铸影即可供电子显微镜研究。例如,用此法可
制备细菌染色体标本。先用溶菌酶把细菌细胞膜消化掉,将得到的原生质体置于蒸
馏水中使之胀破,染色体可呈一条长纤维游离出来并展开在蒸馏水的表面,捞起后
可进一步制成供电子显微镜观察的标本。植物和动物细胞的间期染色体,以及某些
细胞含有的微管,都可采用这个方法制片。

    使用电子显微镜时最不方便之处,就是须要制备干燥的超薄切片并须在真空中
进行观察。超薄切片机的出现使制片的困难大部分得到克服。利用这种切片机可以
切出厚度为0.2 至0.02微米的切片。但是,脱水和除去溶于样品中的盐类以及染色
剂的应用,都会改变结构。因此,对电子显微镜下观察到的生物膜、细胞质或其它
有形成份,在解释和说明时应持慎重态度。尽管有这些困难,但是越来越清楚地看
到,近年来由于用电子显微镜研究所做出的贡献,使我们对细胞的了解达到了一个
崭新的水平。

    如果某些生物样品在染色后其结构与背景的反差仍然很弱,这时常采用重金属
铸影法来加强反差,甚至可得到三维图象。将重金属,特别是金、铂、铬置于真空
蒸镀器中加热蒸发,使金属蒸气斜向地喷溅到样品上。就像流沙或雪花被风吹到地
面的物体上形成阴阳面一样,喷溅到样品上的金属也可把样品的轮廓勾划出来。在
蒸发喷溅时,还可使样品转动,从不同方向进行铸影。

    如果样品太厚不宜用铸影法时,还可采用复型法。其法是在真空中用金属蒸发
法在样品表面镀一层厚度达若干纤米的铂和碳。然后用氢氧化物溶去样品,漂浮的
复型用铜网捞起,制成供电子显微镜观用的标本。


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