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本文标题："蛋白质的碘化作用与大的蛋白质分子的顺序测定"

发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间：2016-9-26 13:37:19

蛋白质的碘化作用与大的蛋白质分子的顺序测定

　　大的蛋白质分子的顺序测定会提出许多问题，但其测定方法基本

上是与测定这个十肽的方法一样的。将蛋白质先用胰蛋白酶和胰凝乳蛋

白酶分裂成较小的、容易确定的肽。然后利用某些取决于肽的电荷豹技

术将这些肽分离。这类技术包括电泳，在电泳时带电荷的样品在电场中

移动，移动速度取决于分子的电荷和大小；还有离子交换层析法，该法

是依靠在不同情况下，样品与带有电荷的离子交换树脂结合力的不同来

分离肽。然后找出各肽的详细顺序。采取利用两种酶提供的“重叠法”

，就可以弄清楚蛋白质的一级顺序。某些试剂可用来测定很大的蛋白质

的结构，这些试剂可在一定的氨基酸残基处专一性地切断键，如溴化氰

可以在甲硫氨酸残基之后的地方切断。蛋白质通过这种断裂首先变成比

较容易处理的肽。含有数百个氨基酸的蛋白质的结构都可以用这种方法

搞清楚。

　　同样，如果酪氨酸是活性中心的残基，那么蛋白质的碘化作用就可

以引起活力的丧失，可用FDNB处理来证明活性中心的赖氨酸、组氨酸和

酪氨酸残基。这些方法没有一个是对鉴定活性中心残基绝对专一和具有

结论性的。不过将各种方法结合使用，再参考从动力学研究得到的证据

，很多酶的活性中心的性质是可以测定出来的。

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