本文标题："宿主细胞培养物或生物研究图像显微镜"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2016-11-8 9:31:10
宿主细胞培养物或生物研究图像显微镜
蛋白质纯化的特定要求变化很大，工业上用的许多酶其实并不很纯
，但是，只要它们能够胜任工作，也就足够了。“加工”用酶(如
口一淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶)被成吨地生产，主要以细菌培养物
分泌产物的形式来生产。为了尽可能地降低成本，这些酶只经过了
有限的纯化工艺。而在另一种极端情况下，用于研究和分析的酶产
品则需要进行高度的纯化，以保证污染物的活性不会干扰酶的目的
用途，任何熟悉分子生物学用酶的人都知道，微量的DNA酶或RNA酶
污染可能会造成精心设计的实验全盘皆输。
蛋白质纯化所用的大多数方法都是在那个时期建立的，至少其原
理是在那时建立的。较近代的进展主要是仪器装备方面，用来优化
每种方法学的应用。分子生物学的快速发展刺激了仪器装备的进展
，因为基因产物的分离通常要早于基因的分离。一方面由于使用微
量的蛋白质就足以对这些产物进行定性分析(如部分测序)，所以对
大规模甚至中等规模蛋白质生产方法的需求下降，这样，设计专门
用于处理毫克至微克范围蛋白质量的现代设备得到了极速的发展；
而另一方面，使用X射线晶体学和核磁共振(NMR)的结构研究需要几
百克的纯蛋白质，因此在实验室研究中仍然需要大规模的设备和方
法。
所研究的蛋白质性质也发生了很大的变化，尽管酶曾经是最热
的研究对象，但现在已被一些非酶类的蛋白质(如生长因子、激素
受体、病毒抗原和膜转运蛋白)所超越。在这些蛋白质中，有许多
在天然材料中的含量极微，其纯化会成为一项主要的工作。在过去
曾进行了巨大的努力，使用了千克量的起始原料(如人体器官)，而
最后只得到了几微克的纯产物。而现在更通常的做法是使用遗传学
的方法：在蛋白质被纯化之前甚至在被正确鉴定之前克隆基因，然
后在适当的宿主细胞培养物或生物中表达，表达水平会比原始材料
高几个数量级，这样会使得纯化工作相对简单。预先知道一些蛋白
质的物理特性会很有用，有助于建立适当的纯化方案，从重组材料
中纯化蛋白质。从另一方面讲，现在制备融合蛋白的方法很多，可
通过亲和技术进行纯化，而不必知道目的蛋白的任何性质，而且也
有方法对表达产物进行修饰，以进一步简化纯化步骤。
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