本文标题："激光扫描显微镜采用了双光子(和三光子)来激发"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2016-12-25 22:32:41
激光扫描显微镜采用了双光子(和三光子)来激发
快扫描共聚焦显微镜可控程度不如线顶式(top of the line)
慢扫描显微镜扫描模式，有些以摄像速度成像的共聚焦显微镜不能
选用多波长照明。以摄像速度成像的显微镜要选用裂隙孔径而不是
针孔孔径，而前者的横向及纵向分辨率较差。
有一种快速扫描共聚焦显微镜，因为它价格低廉(还有其他原
因)值得一提，它用有多个针孔(约200 000个)的自旋盘同时照明来
检测标本内多点的发射光。光源可以用激光器或那种用于传统表面
荧光显微镜的宽光谱灯。这种共聚焦显微镜的主要优点在于它能较
快的采集图像高达700帧／s，解线率(1ines resolution)为5000线
]。它的图像可以直接用眼观察，也可以用灵敏的相机照下来。它
的主要缺点在于自旋盘只能通过获得光线的1％左右，原因在于自
旋盘内的孔需要较大的间隔。最近有一种新型自旋盘共聚焦显微镜
问世了，它用显微透镜来提高透光率，共聚焦成像速度高且灵敏度
也较高。
另一种很有价值的激光扫描显微镜采用了双光子(和三光子)激
发来诱导荧光产荧光团吸收两个光子时产生双光子激发，每个光子
各自拥有促使荧光团进入激发态的能量的一半。只有在焦点位置的
光强度才能满足同时吸收双光子的需求，所以只有焦平面上的荧光
团才能被激发。因此，在检测仪前不安装空问滤光片的情况下，双
光子激发仍可以进行光切。此外，由于焦点外的荧光团不被激发，
所以与传统的激光扫描显微镜相比，它的标本不容易发生光漂白。
与单光子激发相比，双光子吸收用以激发可见光荧光团所需的波长
更长、组织穿透力更好，因此能检测标本更深处的结构。另外，传
统激光扫描显微镜选用紫外波长时，紫外荧光团成像会出现较多问
题，但如果使用双光子激光扫描显微镜，则许多问题都不会发生。
目前双光子共聚焦显微镜的一个缺点是合适的激光器的价格太高。
现在市场上已有双光子扫描显微镜(Bio—Rad，Leica)。应用指南
成像参数的优化物镜选择
由于大数值孔径的物镜比小数值孔径的物镜采光多(亮度相当
于NA4)，所以通常荧光显微镜最好选用大数值孔径的物镜。大多数
高质量大数值孔径的物镜的可见光波长页
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激光扫描显微镜采用了双光子(和三光子)来激发,金相显微镜现货供应
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