本文标题："制备不同含酚浓度耐酚平板培养基-图像显微镜"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2017-1-19 4:4:57
制备不同含酚浓度耐酚平板培养基-图像显微镜
涂布分离、培养、连续划线分离
在无菌操作下，将采集的含酚污水样品按适当稀释度稀释后，涂
布在上面制备的梯度平板上。涂布好的平板置恒温培养箱30℃培养
2天，平板上生长的菌落也呈密度梯度分布。在苯酚低浓度区，高
密度菌落相连结形成菌苔，而在苯酚高浓度区则出现稀少菌落。将
苯酚高浓度区的稀少菌落在含苯酚平板培养基上连续划线分离，最
后挑取单菌落接种于苯酚斜面培养基，30 ℃培养2天。
降解性能测定
1．初筛
制备不同含酚浓度的耐酚平板培养基，苯酚浓度为0．025％。
0．075％，涂布或划线分离，在平板中苯酚高浓度条件下生长出的
菌落，即为酚降解能力高的菌株。
2．复筛
将纯化的菌种分别接人含不同酚浓度的耐酚液体培养基锥形瓶
中，30℃振荡培养，在不同时间取样，测定在600rim处的光密度值
OD600，绘制生长曲线。以不含酚的碳源(葡萄糖)培养液为对照。
若与对照相比，在250mg／L苯酚浓度培养液中生长速度下降不明显
，同时，用4一氨基安替比林法(参阅附录四)检测未接种时发酵液
和发酵终止时发酵液的苯酚浓度，计算降解率，若苯酚降解率>80
％，则表明分离到有效苯酚降解菌株。
菌胶团形成能力测定
1．将上面已分离得到的有效苯酚降解菌株，分别接种在盛有50m
L灭菌的蛋白胨培养基、或尿素培养基的锥形瓶内。
2．28℃摇床振荡培养12～16h，凡能形成菌胶团的菌株，培养
物形成絮状颗粒，静置后沉积于瓶底，液体澄清。
对于降解能力较强，且又能形成菌胶团的菌株为性能优良的苯
酚降解菌株，经扩大培养后能供生产应用。
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