本文标题："糖元混合液沉淀化石样品分析图像显微镜厂家"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2019-3-29 3:58:21
糖元混合液沉淀化石样品分析图像显微镜厂家
上清液再用等体积的酚、氯仿、异戊醇(体积比为25：24：”抽提一次
，抽提过程中要翻转试管几次以混匀液体。值得注意的是，热的提取溶液
会导致有机溶液蒸发而增加试管内的压力，并导致试管冲开。然后在常温
下10000g离心5分钟以分离水相和有机相，将水相转移到一个新的试管内。
在大多数情况下，水相会在上层，但是在盐存在的情况下，分层会颠倒。
因此研究者需要分清水相和有机相后，再弃去有机废液。可加几滴酚到可
疑的有机相中，如果酚进入溶液中，证明是有机相，如果分离则是水相。
再用等体积的氯仿、异戊醇(体积比为24：])抽提一次，翻转试管几次，离
心，转移上清液到新的试管内。在沉淀过程中，可加不含DNA的糖元(1训1m
g／m，溶液)作为DNA的载体。加一倍体积的异丙醇，翻转混匀，于—20~(2
过夜，以沉淀DNA。DNA／糖元混合液在室温下10000g离心30分钟，去掉上
清液，沉淀用]m，70％的乙醇洗两次后，离心，去掉上清液。这一步操作
要特别注意，因为沉淀有可能没有沉在管壁，而在冲洗的过程中被丢弃。
沉淀经过真空干燥(5分钟)，或者在空气中自然干燥，然后溶于100山的]／
10XTE缓冲液中(1 mMTrisHCI，0．0]mMEDTA，pH8．0)。
沉淀可能由于含有褐色杂质而呈深色，这不足为怪；要注意的是，当
用琼脂糖电泳来观察DNA片段大小时，在紫外光下不想要的共沉淀物会发出
蓝色荧光。因为这些化合物可能会影响酶的扩增，因此许多抽提后的纯化
方法可以去掉这些杂质。含有杂质的DNA溶液可以通过硅胶树脂柱(Qiagen)
或者与树脂浆混合(PromegaWizard纯化系统或者Bio101 Gene纯化系统)，
而将杂质从树脂柱上洗掉，或者在溶液当中就被移走。通过改变洗脱液而
将DNA再次释放出来。
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