本文标题："荧光显微镜用灰阶 CCD 感应不同亮度而取得影像"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2013-4-8 5:35:36
在组织工程的领域，希望达到快速组织重建与增生，一般利用生物
统计的方式作为评估，纪录改变变因前与改变变因后细胞的数目或分佈
情形，可以得到一个大方向的变化，例如由细胞的生长週期统计，也许
可以比较出何种材料适合细胞贴附，然而对于欲研究的变因，无法得知
在实验中所产生的影响，更无法做立即性的评估，希望可以藉由细胞生
长的即时影像，产生有用的资讯作为立即性的评估，例如位移、速度等
细胞迁移的资讯，要从影像得到这些资讯，影像处理为目前已知的方
式，可能需透过电脑複杂性的运算，对于运算上时间成本过度消耗，希
望在相类似的影像上找到数学特征，达到快速辨识，聚乳酸-甘醇酸
(Poly-lactic-co-glycolic acid、PLGA)最常用来作为培养细胞支支架，然而
聚乳酸-甘醇酸支架本身不透明，需用染色技术始能看到上面的细胞，本
研究分割细胞染色影像处理，希望未来可以用活细胞染色技术观察细胞
运动，加入不同的评估模型，探讨组织的增生
本研究比较两种染色影像，锥蓝染色（Typan Blue staining）与免疫
萤光染色（Immunol Fluorence Staining）影像，锥蓝染色主要使得细胞
呈现蓝色，有别于支架的颜色，必须用彩色 CCD 才可撷取出不同颜色
变化，利用色调与饱和度的分析，可以找出细胞的分佈，而萤光染色主
要让细胞与支架呈现不同亮度，用灰阶 CCD 感应不同亮度而取得影像，
可以简化影像的複杂度。
免疫萤光染色影像的特性，主要受萤光分佈的影响，在低倍显微镜
下，由于解析度有限，所得影像细胞为一团绿光，分割影像容易，在高
倍显微镜下，解析度因为放大倍率提高，萤光分佈呈离散的状态，在影
像辨识上，利用归类离散点取得细胞边界
使用A、B两种遮罩，分别将免疫萤光染色原始灰阶影像强化
后，利用Otsu统计的方法，找到最佳的二值化阀值，因为遮罩对于萤光
分佈疏密所产生的强化效果不同，最后经过膨胀和侵蚀将萤光离散点汇
聚成单一区块，最后即可找出细胞膜与细胞核的边界
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