本文标题:"茶叶农药残留量计算实验方法步骤!生命科学!"
研究步骤:
(1) 取茶叶10g置入茶具(另取茶叶10g做空白对照组用)
(2) 加入有机氯农药Cl-1组(5μg/mL)1mL。
(3) 冲入沸水后马上倒出第1泡茶水,之后再加入沸水静置2分钟倒出第2泡茶水,(以此类推如第三泡,第四泡,第五泡…)(空白对照组只取第一泡茶水)
(4) 过滤茶水
(5) 并纪录体积V1
No.1茶水 235mL、No.2茶水 192.5mL
No.3茶水 195mL、No.4茶水 210mL
No.5茶水 192.5mL、空白茶水 192.5 mL
(6) 各取100 mL,加入200 mL氰甲烷(CH3CN),摇晃混合。
*摇晃前,量筒内的溶液大约分成上下两层,下层颜色较深,因为茶水的比重>氰甲烷(1:0.777),摇晃后,量筒内的溶液均匀混合。
(7) V2体积纪录(加入200 mL氰甲烷及茶水100mL后的混合体积)
No.1茶水 295mL、No.2茶水 295mL
No.3茶水 297.5mL、No.4茶水 295mL
No.5茶水 297.5mL、空白茶水 297.5mL
p.s.有缩合的现象,所以体积会减少2.5~5 mL
(8) 再各取混合溶液100 mL,加入氯化钠(NaCl) 15g摇晃,静置15分钟。
*因NaCl与CH3CN不互溶,所以将NaCl加入此混合溶液中,过多的NaCl(15g)使水达到饱和状态,无法再溶解CH3CN,故会上下分层。
(9) Va体积纪录(加入NaCl 15g摇晃且静置15分钟后)
(全部液体)
No.1茶水 107mL、No.2茶水 107mL
No.3茶水 108mL、No.4茶水 106mL
No.5茶水 108mL、空白茶水 108mL
(10) Vb体积纪录(下层液体)
No.1茶水 31mL、No.2茶水 31mL
No.3茶水 31mL、No.4茶水 31mL
No.5茶水 32mL、空白茶水 31mL
*V3体积(上层液体)=Va-Vb
No.1茶水 76mL、No.2茶水 76mL
No.3茶水 77mL、No.4茶水 75mL
No.5茶水 76mL、空白茶水 77mL
(11) 取上层液10 mL,置于试管内,用氮气(N2)吹乾。
(12) 吹乾后,加入2 mL正己烷(n-C6H14)溶解试管中的残留
物(可能含有茶叶中的色素杂质及农药),搅拌。
(13) 先加正己烷润湿固相萃取匣。
*其目的在于保湿以及不让上次实验残留物影响
(14) 再移入步骤12.的正己烷溶解液(让残留物留在固相萃取匣)
(15) 加入冲提溶液(10%丙酮/正己烷)5mL 冲提2次。
*将农药冲提出,色素杂质留在萃取匣中
(16) 收集冲提液,N2吹乾,然后加入1mL正己烷,搅拌。
(17) 移入GC自动样品瓶。
(5支分析样品、1支空白对照、1支有机氯农药标準对照)
1
(18) 注入气相层析仪/电子捕捉检出器(GC/ECD)分析有机氯农药之含量。
3.气相层析仪分析条件
(1)层析管: J&W DB-608 , 30 m X 0.53 mm X 0.83 um
(2)烘箱温度:起始温度为210℃,维持25min,以6℃/min速度升温至270℃,维持20min,再回温至50℃。
(3)注射口温度: 250℃
(4)检出器温度: 300℃
(5)载流气体:氮气(N2),纯度99.995﹪
(6)载流气体(carrier gas) N2 流速: 6.0 ml/min
(7)辅助气体 N2 流速:25 ml/min
(8)检出器 : 电子捕捉器(ECD)
4.农药残留量计算
依GC层析图得到标準校正曲线,求出检体中农药残留量:
农药残留量(ppm) = C×1mL×V2×V1
V3×V1×100 mL×W
C:由各农药校正曲线求得之浓度(μg/mL)
V1:抽气过滤,过滤茶水体积(约200mL)
V2:加入200 mL氰甲烷及茶水100mL后的混合体积(约300mL)
V3:加入NaCl 15g摇晃且静置15分钟后,上层液体体积
W:茶叶重量(10g)
5.回收率
回收率=(实验值/理论值)×100﹪
实验值:实验分析结果值
理论值:添加农药标準剂于茶叶之含量值
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