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本文标题:"标准平板计数法计数微生物是最广泛应用的一种方法"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2015-5-14 5:41:35

标准平板计数法计数微生物是最广泛应用的一种方法

 
    从环境试样中分离微生物的过程常常需要进一步分离从涂布或倾注平板法中
发现的单个菌落,对其鉴定或确认。在这个方法中,常用无菌接种环把菌落从原
始培养平板中挑取并划线稀释到新的琼脂培养皿中
 
    标准平板计数法计数微生物是微生物学中最古老、最广泛应用的一种方法。
尽管广泛应用,这种稀释平板技术自从它的使用之初就受到怀疑和批评。主要批
评的一点是:像显微观察那祥,整个群体中仅有很少部分能在实验室培养基中培
养。大量文献说明,直接显微计数的细胞数中只有1%一10%的细胞能用平板计
数技术复活成可活的细菌。各种方法之间存在的巨大差异可能是多
方面的因素产生的。首先,低底物水平的环境试样中含有一些营养饥饿或寡营养
生物,它们生长得很慢或根本就不可培养,所以不能在规定时间内形成菌落;其
次,由于提取和稀释过程中施加的压迫导致活的微生物变得不可培养;再一个原
因就是菌落形成过程中细菌间的竞争抑制了某些微生物的生长;另外,所有微生
物都在营养物和电子受体需求方面有不同的最适宜及最低的生长条件。因此,某
些微生物在培养基中长得很慢或根本不生长。因为大多数自然环境都是寡营养
的,因而平板培养基的营养状况是进行活细胞计数所考虑的重点。许多土壤分离
菌在贫营养培养基中比富营养培养基中生长、繁殖得更好。最后,活细菌的回收
(指使一个细胞形成一个菌落)所产生的偏差是由于提取步骤中细菌从土壤颗粒
中的不完全释放或稀释过程中细菌的不完全分离。这使得菌团长成了单个菌落,
从而导致出现的菌落数偏低。很难确定这些因素中是哪一种导致直接计数与活细
胞计数间存在的1-2个数量级的差异。
 

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