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本文标题:"用光学显微镜可对蛋白质定位细胞形状研究显微镜"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2015-12-3 15:26:22

用光学显微镜可对蛋白质定位细胞形状研究显微镜

 
细胞形状的每时每刻维持也依赖于细胞骨架成分的装配。
现有两种实验方法可用于检测间期细胞骨架的装配,但
这两种方法都有某些局限性。一种方法是微注射可在体外装
配的荧光标记蛋白,用光学显微镜可对蛋白质定位;某
些动力学特征可用光漂白测定。以这种方式观察到的结构几
乎总是可信的,即其结果与免疫荧光所见相符合。微注射方
法有某些限制性,它们只能用于识别与溶相交换的结构组分,
 
但是不能检出在数小时内不发生交换的极为稳定的组分。它
们不能鉴别装配和交换。注射后立刻弥散的方式变成为分离
定位的方式。这是与装配成进行交换的结构或与有限数目结
合部位的连接一样都是相一致的。动力学可能起指令作用。
业已发现a肌动蛋白和vinculin与粘附斑紧密地结合,但这
需要数小时,而它们所连接的结构的形成和溶解只需数分钟。
这表明,虽然蛋白质密切地结合,但它们进入这些结构的通路
不是细胞内的主要途径。这些研究的另一个局限性是荧光会
使结构扩大。这些研究的要点是:(1)用此方法观察到的装
配通常是可靠的;(2)动力学上能与结构本身的形态区别;(3)
 
在某些情况下,它是细胞特异的;(4)微管蛋白装配的方向
与远侧快装配端是一致的;(5)用这种技术在任何细胞中检出
的最活动种类肌动蛋白比肌动蛋白单体大,提示细胞内只有
极少量的肌动蛋白是游离G肌动蛋白,这些缓慢移行的
复合物可能是肌动蛋白低聚物。或是与肌动蛋白特异蛋白相
连接的肌动蛋白。 

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