本文标题:"脂多糖类物质细胞分析图像显微镜"
发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间:2016-12-22 1:7:52
脂多糖类物质细胞分析图像显微镜
大量外源蛋白质的生产可能触发热休克反应。热休克调节子的响应
将增加蛋白水解活性。在一些情况下,胞内蛋白水解活性导致产品
降解速率等于其生产速率。
更易发生的是:目标蛋白形成包含体。虽然外源蛋白是包含体
中的主要成分,但通常包含体中也包含一些其他细胞物质。包含体
中的蛋白质发生了错误折叠。错误折叠的蛋白质是没有生物活性的
,也是毫无价值的。如果从培养液中回收包含体,包含体能被重新
溶解并恢复活性(价值)。如果重溶过程很简单,而且恢复率非常高
,则包含体的形成就是有利的。因为它简化了回收和纯化的起始步
骤。在重溶过程中,用几种分析方法来检查蛋白质以确保没有发生
化学修饰作用是很重要的。即使一个侧链基团中的轻微变化也会改
变产品的效用。
生产胞质蛋白质(即非分泌性蛋白)也会产生一些其他非常严重
的后果。大肠杆菌中的胞内环境可能不利于二硫键的形成。在大肠
杆菌中,这些蛋白质(外源的)的第一个氨基酸通常是甲硫氨酸,而
在这些蛋白质的固有宿主细胞中,经过正常的翻译后加工,它们的
第一个甲硫氨酸被切掉。如果产物被保留在细胞内,在回收时就必
须裂解(破碎)细胞。细胞裂解通常导致大肠杆菌中内毒素(或热原
质)的释放。内毒素是脂多糖类物质(在外膜中),它能导致不希望
发生的副作用(例如高烧),并造成病人死亡。因此,产品纯化就是
一个非常重要的考虑因素。
可通过蛋白质分泌和排泄(secretion and excretion)来避免
大肠杆菌的上述许多限制。在这里分泌被定义为蛋白质穿过大肠杆
菌内膜(到达细胞周质)的运输过程。排泄被定义为蛋白质(从细胞
周质)释放到胞外的过程。
大肠杆菌中约有20%的总蛋白被运输穿过内膜而进入细胞周质
空间,或者掺入外膜中。
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