本文标题："琼脂培养基常用于将噬菌体或细胞在平板"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2017-1-14 4:30:18
琼脂培养基常用于将噬菌体或细胞在平板
顶层琼脂培养基
顶层琼脂培养基常用于将噬菌体或细胞在平板的表面均匀分布
成一薄层。以1L的批量配制顶层培养基，高压1 5 min并使之熔化
，冷却至50℃，轻轻旋转晃动使其混合均匀，分装至100 ml烧瓶中
。再次高压，冷却，于室温保存。使用前，用水浴或者微波炉熔化
顶层琼脂，然后冷却至40一50℃并维持在该温度。顶层琼脂中琼脂
的含量比普通平板要少，如果置于45～50℃温度，顶层琼脂可保持
熔化状态数天。质粒图谱
质粒在所有的细菌类群中都可发现，它们是独立于细菌染色体
外自我复制的DNA分子。自然界中，质粒是在营养充足时出现，它
在结构，大小，复制方式，每个细菌的拷贝数，在不同的细菌体内
的繁殖力，在菌种之间的转移力等方面都会变化，可能最重要的是
质粒所携带的特征的改变。大多数原核生物的质粒是双链环状的DN
A分子；但是无论是在革兰氏阳性还是阴性菌体内都可发现线状质
粒。质粒大小变化很大，可从几个到数百个kb。质粒依靠宿主细胞
提供的蛋白质进行复制，但也可使宿主细胞获得质粒编码的功能。
质粒复制可以与细菌的细胞周期同步，导致菌体内质粒的拷贝数较
低，质粒复制也可独立于细胞周期，使每个菌体内扩增了成百上千
个质粒拷贝。一些质粒在菌种间可自由地转移它们的DNA分子，另
一些只转移质粒给同种细菌，而有些却根本不转移它们的DNA。质
粒带有具有许多功能的基因，这些功能包括对抗生素和重金属的抗
性，对诱变原的敏感性，对噬菌体的易感或抗性，产生限制酶，产
生稀有的氨基酸和毒素，决定毒力，降解复杂有机分子，以及形成
共生关系的能力和在生物界内转移DNA的能力。
所有的质粒载体都有三个共同的特征：一个复制子，一个选择
性标志和一个克隆位点。复制子是含有DNA复制起始位点的一段DNA
(ori)，也包括表达由质粒编码的复制必需的RNAs和蛋白质的基因
。选择性标志对于质粒在细胞内持续存在是必不可少的，通常是显
性的，并且往往是编码对某个抗生素有抗性的基因。克隆位点是限
制性核酸内切酶切割位点，外源性DNA可由此插入质粒内，而并不
影响质粒的复制能力，或为宿主提供选择性表型。载体发展的趋势
是单一载体具有多个特征。
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