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本文标题："多聚酶浓度一般为0．5-5单位之间-材料显微镜"

发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间：2017-1-20 12:52:1

多聚酶浓度一般为0．5-5单位之间-材料显微镜　　

　　严格确定引物退火温度，一般为50-60℃。较高温度会增强引物与

模板的正确识别和结合，同时能降低引物3’端不正确核苷酸的错误延

伸。但温度不能过高，过高温度会破坏引物与模板结合。

　　延伸温度通常约72cC。

　　(二)多聚酶浓度：一般为0．5-5单位之间。酶量少，合成产物量较

低，酶量高，会造成非特异性产物量增加。

　　(三)镁离子：PCR扩增过程中镁离子浓度应保持在0．5-2．5mmol／

L之间。镁离子浓度可影响引物退火、模板和PCR产物的解离、产物特异

性、引物二聚体生成和酶活性等。

　　(四)平台效应：平台效应是指PER循环后期，合成产物到达0．3～1

pmol水平时，由于产物的堆积，使原来以指数增加的扩增速度变缓慢。

导致平台效应因素包括：dNTP或引物等不断消耗，反应物(帅或酶)的稳

定性，最终产物(焦磷酸盐，双链DNA)的阻化作用，非特异性结合和引

物二聚体参与竞争。

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