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本文标题:"动物细胞标准的激发源成像细胞分析显微镜"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2017-3-14 3:43:23

动物细胞标准的激发源成像细胞分析显微镜

 
 哺乳动物细胞时延性共聚焦成像以下的许多步骤适用于任何配置
的显微镜,不过本例是关于时延性共聚焦成像的,这是一个普通的
GFP时延性成像试验,使用的是激光扫描共聚焦显微镜。1.除了是
在二氧化碳浓度可以控制的环境中捕获细胞影像,其他条件下成像
均需要补充不同的大气二氧化碳水平。例如,如果需要含有血清的
生长培养基,加入25mmol/L HEPES,pH7.6,可以满足某种类型
的细胞成像。如果可能的话,用小型仪器监测缓冲液中的细胞。2
.用括号中的任一仪器保持成像细胞的温度(例如,完全封闭的显
微镜培养箱,循环水浴温度控制器,独立控制的阶段加热器,热空
气对流元件)。注意:这些温度控制元件的效率和价格按照从前到
后依次递减。3.各种可用的荧光蛋白极大地降低了成像的硬件要
求。使用标准的激发源和滤过设备能捕获很多这些蛋白质。表5.1
0.1列出了激光激发源的一些常用变量。4.EGFP和EYFP,作为最
常用的绿色荧光蛋白,能在一定程度上抵抗光漂白作用,但是在任
何试验中都要考虑这种现象。应该尽可能地降低这些激发力,以延
长荧光标记物的寿命。5.通常尽可能地保持蛋白质的低表达,

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