本文标题："荧光显微镜物镜的光圈(NA)和激发光的波长技术"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2017-3-12 3:3:46
荧光显微镜物镜的光圈(NA)和激发光的波长技术
如果最早一次的成像可行，那么在以后所有的GFP时延性实验中
，采用已经摸索出的设备参数，如扫描时间，激发水平和检波器的
捕获和筛检，保持成像的一致性，或至少可以作为一个良好的起点
。8．设置图像理想的像素大小。许多设备有可选择的范围(64像素
×64像素～2048像素×2048像素)。通常，每平方微米的像素越多
，影像就越清晰；然而，这些高像素的影像在同样的像素设置时间
中需要更长时问的扫描，并且需要更多的储存空间。记住为了使数
码影像保持空问分辨率，应该调整像素的大小到每个可分解单元≥
2个像素。可分解单元(r)取决于物镜的光圈(NA)和激发光的波长Q)
(r—o．61xz／NA)。9．为每个影像设置理想的扫描时间。像前面
提到的，研究进程的相对速度在一定程度上决定扫描时间。通过改
变像素设置时间(每个像素收集荧光的时间)改变总的扫描时间或者
平均一个像素所需要的时间(多次影像扫描后，单个像素收集的总
荧光除以扫描次数)。简单地说，改变扫描时间在本例中不会引起
差别。然而，如果使用平均像素，则应考虑到与画面平均(重复扫
描整张影像)相对的线平均(用平均的像素重复扫描单一的像素线，
进行平均)与平均画面。在活细胞中，荧光标记的蛋白质可能正在
细胞中运动，而且平均画面像素经过扫描一整张影像所需要的时间
在不同的时间点被收集。这样将会使荧光信号在比平常更大的范围
内丢失。
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