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本文标题:"落射荧光显微镜的使用方法-生物细胞图像分析"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2015-9-9 11:24:20

落射荧光显微镜的使用方法-生物细胞图像分析

在落射荧光照明时(指激发光从物镜向下照射样品,用
同个物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜),还需要加
上一个双色束分离器。激发光源发射的光通过激发滤片投射
到双色束分离器上,双色束分离器对短波长的激发光有很强
韵反射能为,但对较长波长的发射荧光却能通过,因此就使
激发光和荧光分开,透过的残余激发光被阻断滤片进一步吸收。  
 
荧光显微镜的使用方法
 
    荧光显微镜的使用方法:
    1.接通电源后,开动荧光显微镜的汞灯启动装置,点
燃高压汞灯,点燃15分钟后进行观察。
    2.根据观察需要选择一定的激发滤片,使之进入光
路,允许一定波长的光波通过,作为激发光源。
    3.根据激发滤片选择相应的阻断滤片进行观察。
    4.如利用高压汞灯进行普通显微镜观察和进行显微铙
摄影时,必须将吸收热和紫外线滤片放入光路,并将中性滤
片同时推进光路,减低光强度。
    5.关闭荧光显微镜后,如需再次使用,需待关闭电源
20分钟后再重新启动,否则造成汞灯雾化,缩短使用寿命。
 
实验步骤
    1.用矛签刮下口腔粘膜上皮细胞涂于载片。
    2.于涂有细胞的载片上滴一滴荧光染液。
    3.加盖片,注意防止气泡发生。用少量指甲油把盖片
边缘封好,待指甲油干后,即可在荧光显微镜下观察。
    4.把用于紫外光的激发滤片、双色束分离器/内装阻
断滤片的组合块置于光路。用40倍或100倍荧光油浸物镜可
观察细胞核记录细胞核发射何种颜色的荧光。
    5.再换入紫或蓝光的组合块,观察线粒体并记录发何
种颜色的荧光,特别注意线粒体呈何种形状。

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