本文标题："食品样品细胞特征比表型特征分析显微镜"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2017-8-13 18:19:3
食品样品细胞特征比表型特征分析显微镜
遗传检测
前已述及的快速微生物检测和鉴定方法是基于微生物遗传特性
所产生的表型。这些表型受生长条件(如温度、pH、营养、氧化还
原电位、环境和化学压力、有毒物质以及水分活度等)的影响。基
于表型的分析方法(甚至包括免疫学检测)都依赖于微生物细胞产生
能被抗体识别的抗原或能被抗原识别的抗体。诊断微生物学中传统
的“金标法”依靠表型的表达或变异所产生的特征来检测。
细胞的遗传特征比表型特征稳定得多。细菌的自发突变频率约
为一亿分之一。因此近年来遗传检测技术有所发展，成为诊断微生
物学中的确证环节。关于这方面的争论还在继续，监管微生物检测
的政府部门和法规制定机构之间还没有作出统一的决策。本节主要
讨论基于遗传检测技术的诊断和鉴定系统。
遗传检测的第一个阶段是采用已知的DNA探针与未知细菌的DNA
序列进行杂交。Genetrak系统(Fμmingham, MA)提供了一种灵敏便
捷的方法来检测食品中诸如沙门菌、李斯特菌、弯曲杆菌和大肠杆
菌0157等病原菌。最初，该系统采用标记在DNA探针上的放射性同
位素来检测未知培养物中的互补DNA。此类第一代探针的缺点有:①
大多数食品实验室不希望在常规分析中使用放射性物质;②一个细
胞内的DNA拷贝数有限。第二代探针利用酶反应来检测病原菌，并
以RNA作为靶分子。一个细胞内仅有一个完整的DNA拷贝，然而核糖
体RNA的拷贝数可能有1000一10000个。因此，新一代的探针采用颜
色反应来检测目标RNA。对食品样品中的细菌(如沙门菌)进行约18h
的富集后，用去污剂将细胞(目标细胞以及其他微生物)溶解以便胞
内物质(DNA, RNA及其他分子)释放到溶液中。
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