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本文标题:"植物化石粉粒超微结构分析电子显微镜技术"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2019-4-4 1:30:37

植物化石粉粒超微结构分析电子显微镜技术

 
 
   过量染液的沉淀产生的假象可能被解释为花粉或孢子壁的不同组成成分
,或者染色过度,从而导致观察不到特定结构。仅仅根据无法控制染色方
案的几张切片来讨论有关壁层个体发育的结论是不准确的;同时,仅仅根
据一个花粉粒的几张切片,可能会观察不到萌发孔器或特定细小结构。并
非所有的孢粉颗粒都处于相同的发育阶段,同时其保存条件也不尽相同,
故没有一种通用染色方案。这样就要求研究人员对不同浓度的染液摸索其
染色时间,并将染色方案仔细地记述在论文的切片方法中。
 
    包埋和定位
    除了需要对许多颗粒切片,在超微切片之前,需要对每个花粉粒或孢
子进行准确定位。有几种方法可用来定位,一种方法是用薄晶片来包埋标
本,使得在切片时能看到并定位颗粒。最常用的化石孢粉粒包埋材料是Epo
n-Araldite或Spurr低粘度树脂(生产商提供了如何制备不同硬度树脂的说
明书;美国的EM供应商)。例如,大花粉粒或孢粉可以在浅的铝质平底锅(
直径为4.ocm)中直接包埋。化石孢粉粒的包埋也可以将花粉粒加到一滴树
脂上,树脂滴位于两个镀有聚四氟乙烯的标准显微镜玻片之间,并在透射
光下观察晶片,选择理想的花粉粒。另一方法适用于小花粉粒或分散样品
,用吸管把花粉粒吸到纤维素滤器上,接着在琼脂中对滤器双面镀膜。将
这些滤器脱水,并在浅平底锅中用树脂逐渐浸透。还有一种方法是将花粉
粒放在小块琼脂中,对琼脂块用4%的低聚甲醛和2%的锇酸处理,再用不
同浓度乙醇逐步脱水,随后移入氧化丙烯中,并用Epon-Araldite包埋。所
有这些方法为了能够从树脂晶片中切下一小块含有花粉粒的块体,将该块
体用胶水粘到一根苯乙烯的杆上,并将该杆固定在超薄切片机的卡盘上,
这样确保切片处于一个理想的方位。斜面可能会出现对花粉粒结构和壁层
厚度的不准确结果,特别是压型花粉粒,故切片的准确定位特别重要。有
一个恰当的例子正说明了这一点。内网是具真气囊花粉粒的气囊内壁延伸
一小段距离而形成的。虽然原气囊花粉粒表面可能具有与真气囊型花粉相
似性特征,但是这些气囊含有从气囊内壁一直延伸到气囊本体外表面的细
线。在一个穿过内网的斜切片上,有可能将真气囊花粉粒误认为原气囊型
的花粉粒(Osborn&Taylor,1993)。上述两种颗粒的识别,有利于解释花粉
壁的形成,甚至气囊的演化,同时是系统发育重建中一个潜在的重要特征

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