任何曾经作过细胞培养的人,都会遇到与污染有关的问题,污染的发源来自许多形式,它有可能是已感染的细胞,设备,药剂,试管及由空气传播之细菌的结果,因为它可以在不利的环境下造成恶性循环,基于重要性,追踪可能的污染源有两个范围,包含:一个是细胞培养实验室的準备工作,另一个是细胞培养处理的技术步骤。受污染的有机体一般有:细菌(bacteria),霉菌(fungi),酵母菌(yeasts),病毒(viruses),及霉浆体(mycoplasma)。通常,细菌污染透过与人直接接触而发生,而霉菌污染极不易避免,一旦它们已经污染实验桌或培养箱,霉菌形如长马蹄状及似绵羊毛状的生长是可以用肉眼看见,霉菌通常透过空气传播,酵母菌也属于霉菌类。

 

而透过病毒来污染似乎较不常见,原因可追溯于病毒对于超过37C温度的极敏感度。另一方面, 经由霉浆体的细胞培养感染较常发生,它们持续较久及不易处理,然而,使用较先进的方法,可以易于辨识它们。霉浆体异于细菌,因为,霉浆体分子更小,在0.22um至0.20um之间,没有细胞壁及单细胞生殖,因为霉浆体感染时不常产生剧烈影响,即使,它在各种状况下,入侵至受感染的细胞的metabolism内,它可维持长时间不被发现。所以,霉浆体的感染源不易追踪,因为,它会以新方式的  cell lines 引入实验室,即使,这血清产品制造者保证免于受到霉浆体的感染,但是,事实上,污染之血清仍是较有可能的原因。胰蛋白也是感染源之一,因为胰蛋白是由猪的胰脏产生之酵素,但常用于细胞培养过程中,如:enzymic dissociation of cells,由动物源感染的物质是一种危害,尤其是霉浆体。霉浆体也来自实验室人员的嘴巴及喉咙地区。

 

 

感染的第二个基本风险在于过程中使用的器具,特别是培养箱。毫无疑问地,培养箱可以为感染的原始发生负起责任,因为,它经常从外界被引入。虽然如此,因为要有良好的细胞培养之缘故,所以,必须将有效的保护机制放入操作中。故当评估各种培养箱系统时,以下所有保护机制应该列入考虑,如清除培养箱内的滋生物方式中,最可靠有效的为:至少维持温度180C的加热灭菌及经常能够把此当作必要条件。

 

 

在细胞成长中很重要的，是藉由箱内的大量湿度容量，在二氧化碳培养箱维持等渗压的渗透压比例。在过程中，需确保对抗污染的防御力。在此方面特别重要的是乾爽的内墙、简单的清洁及可靠的灭菌。现已采用的有两道程续：箱内无控制的水箱系统或昂贵、可控制的外部潮湿系统。就两道手续而言，各有其利处；故WTB Binder有利地将其结合成一全新开发的系统。此新专利的Permadry系统是一具备可控制湿度释放(可高达98%相对湿度)的可拆装双重水箱系统。此系统很可靠地可除去所有污染危险。

 

 

      培养箱对外最常见的污染途径包含：排气风扇轮轴,来自外部湿度系统的

流入流出物,测量路径埠,供气设备;无疑地，在箱内的循环风扇将被视为所谓的细菌弹弓(slingshot)，如此一来，在箱内中会发现空气传播的细菌。更进一步来说，绝对没有外部湿度系统流出流入的联结。因为在此便会产生最大的污染危险：由于温度的不同，入口及出口处易产生凝结。而值得一提的是WTB Binder 二氧化碳培养箱的密闭系统，因唯一外部联结即气体入口，还是受fine filter的保护。此外，此密封系统亦有如下优异处：极小的系统联结，却有着极大的稳定度和极小的故障率。对使用者来说是非常有亲和性的。此一体成型(又称bath tub)，完全无缝之内槽有着类似盆状圆弧边缘；这是为何不可能会酝酿细菌的温床，且无障碍的落实完整的清洁及消毒。

 

 

   其他方式包括人为的内部消毒,此方法仅在可触碰到的地带才有效果, WTB Binder在培养机制上呈现一种非常进步的设计,采用bathtub原则,整个内部能够简单地清理及清洁后,不会留下剩馀物,因为,整个器具,包括基座,可以有弹性地移动。另一方面,有hot-air灭菌的装置,所以,内部元件都不需更动,另一个在cell lines最大感染是由空气传播污染的方式,故将不要的浓缩物留在里面,造成细胞感染。