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本文标题:"酵母菌株-酿酒酵母微观分析图像显微镜"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2017-8-30 0:0:6

酵母菌株-酿酒酵母微观分析图像显微镜

 
研究粉已经被分泌的淀粉酶水解者从泡盛酒曲霉(Aspergillusawam
ori)分离了全长的葡萄糖淀粉酶的cDNA,克隆到酿酒酵母质粒上,
并受到酵母烯醇酶EN01基因启动子和转录终止子的调控。实验室构
建的一种携带葡萄糖淀粉酶cDNA质粒的酿酒酵母具有这种活性,可
以将可溶的淀粉发酵成为酒精,这表明上述方法可行。
    但遗憾的是,这种实验室酿酒酵母菌株的某些性质不适用于商
业生产,比;如它不耐高浓度的酒精;不能有效表达葡萄糖淀粉酶
cDNA;在没有维持质粒存在的特殊条件(选择压力)下,将大量遗失
质粒。这些问题并不是难以克服的,首先通过消除质粒上EN01启动
子上175 bp的负调控区域,葡萄糖淀粉酶的表达水平几乎增加了5
倍;其次通过消除酵母的复制起点,添加与酵母染色体同源的DNA
片段,构建整合型载体。这种形式的质粒,能将完整的葡萄糖淀粉
酶基因整合进入染色体位点,稳定保存。还可以利用另一种耐酒精
的酿酒酵母(啤酒酵母)作为宿主菌,转化整合型载体。
    通过这些改造,研究者制造了两种新的酵母菌株。这些菌株比
天然存在分解淀粉的凝聚性酒精酵母(Saccharomycesdiastaticus)
更好,该酵母与酿酒酵母相近,可以水解和发酵可溶性淀粉(表13
.4)。带有整合型葡萄糖淀粉酶基因的啤酒酵母效果优于多拷贝游
离型基因的实验室菌株。这种差异反映了质粒的不稳定性造成葡萄
糖淀粉酶基因的丢失。只有转入克隆的葡萄糖淀粉酶基因,实验室
菌株和酿酒酵母的啤酒酵母菌株才能利用可溶性淀粉。不论是游离
还是整合,泡盛酒曲霉葡萄糖淀粉酶的cDNA都是在正N01,调控信
号的控制之下,其中去除了175 bp的负调控区域。质粒在选择压力
下保存。
 

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